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实时荧光定量PCR结果解析 - 尊龙凯时(中国区)人生就是搏的常用术语指南

来源:毛江初 日期:2025-03-14

校正染料(ROX)用于修正加样误差和孔间误差,为实验提供一个稳定的基线,从而显著提高定量的精准度和重复性的数据重现性。但是需要注意的是,不同仪器对ROX的需求可能会有所不同。基线PCR的最初几个循环中,荧光信号变化微小。阈值被认为是可信的最小荧光值,而CT值则是扩增曲线与阈值交点的横坐标。

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在结果有效性判断方面,融解曲线需要呈现单峰特征,而扩增曲线应显示出指数扩增区域,且复孔间的CT值标准差应小于0.2。合理的阈值应设置在指数增长期,虽然仪器会自动计算阈值,但并非在所有情况下都合理,因此在必要时应进行手动调整。通过NTC(No Template Control)可以确认无气溶胶污染,这一控制反应用水代替模板;若ΔCT=NTC(CT值)-目的基因(CT值)≥3或≥5,则表明气溶胶污染不会影响实验结果的准确性。同时,通过NRT(No RT Control)来确认无基因组残留,若ΔCT=NRT(CT值)-目的基因(CT值)≥3或≥5,则证明基因组残留不会影响实验的准确度。

待测CT值应处于线性范围内,且其扩增效率应符合标准,PCR扩增效率(e)应介于90%-120%之间。作为专业的生物医疗产品供应商,尊龙凯时(中国区)人生就是搏致力于为生物医药领域提供高质量的产品和技术服务,努力成为基因治疗与细胞治疗领域的创新企业。公司总部位于广州,服务网络覆盖全国,能够迅速为用户提供领先的专业资讯和完善的产品及物流服务。

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